एचआईवी के लिए पीसीआर परीक्षण इसे खारिज कर देते हैं। एचआईवी, एड्स के लिए परीक्षण

एचआईवी के लिए पीसीआर आणविक आनुवंशिक निदान के सबसे जानकारीपूर्ण तरीकों में से एक है। यह विधि रोगी के विभिन्न संक्रामक रोगों और विरासत में मिली बीमारियों की पहचान करने में मदद करती है। एचआईवी की उपस्थिति के लिए बायोमटेरियल की जांच के मामले में भी यही निदान पद्धति लागू होती है, जो एक गंभीर बीमारी है जो रोगी के जीवन भर विकसित होती है। चिकित्सा सहायता के साथ, पीसीआर संदिग्ध मानव इम्युनोडेफिशिएंसी वायरस के लिए शुल्क के आधार पर किए जाने वाले अनुशंसित परीक्षणों में से एक बन गया है। हालाँकि, अध्ययन की विश्वसनीयता 100 में से केवल 80 मामलों में ही सही बैठती है।

एचआईवी के लिए पीसीआर डायग्नोस्टिक्स का मतलब पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन है। इस प्रजाति का अध्ययन करने के लिए विभिन्न प्रकार की जैविक सामग्रियों का उपयोग किया जाता है। इनमें रक्त, इसके अलावा, रोगी की योनि से स्राव या पुरुषों में वीर्य द्रव का उपयोग किया जा सकता है।

ध्यान! पीसीआर के लिए लार का उपयोग एचआईवी के निदान में नहीं किया जाता है। इस तरह के दृष्टिकोण को अप्रभावी माना जाता है, क्योंकि इस सामग्री में एचआईवी के प्रति एंटीबॉडी न्यूनतम सांद्रता में हैं। यही बात मूत्र, पसीने और आँसुओं पर भी लागू होती है।

वर्णित अध्ययन के लिए संकेत एक डबल पॉजिटिव एलिसा (एंजाइमी इम्यूनोएसे) है। वैकल्पिक स्थलों पर बाद में चर्चा की जाएगी।

विश्लेषण के सार के बारे में अधिक जानकारी

पीसीआर द्वारा एचआईवी के विश्लेषण का आधार न्यूक्लिक एसिड की स्वयं को पुन: उत्पन्न करने की क्षमता है। जीवित कोशिकाएं प्रोटीन और इन्हीं एसिड से बनी होती हैं, दूसरे शब्दों में, आरएनए और डीएनए से। अणु आनुवंशिक कोड के संरक्षक के रूप में कार्य करते हैं।
बायोमटेरियल में वायरल कणों (एचआईवी) की कम सांद्रता पर, नमूने में संपूर्ण डीएनए (डीऑक्सीराइबोन्यूक्लिक एसिड) श्रृंखलाएं शामिल नहीं होती हैं, बल्कि केवल उनके घटक, जिन्हें न्यूक्लियोटाइड कहा जाता है, शामिल होते हैं। विश्लेषण वायरस कोशिकाओं के महत्वहीन अवशेषों का भी पता लगाने की अनुमति देता है। यह वह तथ्य है जो प्रारंभिक चरण में - एचआईवी संक्रमण के कुछ सप्ताह बाद - परिणाम प्रदर्शित करने की पीसीआर की क्षमता की व्याख्या करता है।

शिरापरक रक्त के अध्ययन में पोलीमरेज़ श्रृंखला प्रतिक्रिया से सबसे गुणात्मक परिणाम की उम्मीद की जानी चाहिए। उपकरण के साथ नमूना पचाया जाता है। फिर अंशों को एंजाइमेटिक उपचार के अधीन किया जाता है। प्रतिक्रियाशील पदार्थ, वायरल डीएनए के कणों के साथ मिलकर इसकी नकल बनाते हैं। ऐसे तत्वों की संख्या श्रृंखला सिद्धांत के अनुसार तब तक बढ़ जाती है जब तक कि रोगी के रक्त में उनकी उपस्थिति (एंटीबॉडी नहीं) प्रयोगशाला सहायकों के लिए ध्यान देने योग्य न हो जाए। मौजूदा निदान पद्धतियों में से कोई भी बिल्कुल समान सिद्धांत पर काम नहीं करती है।

प्रतिक्रिया घटक

पीसीआर पद्धति का उपयोग करके आप शरीर में वायरस के विकास के बारे में पहले से पता लगा सकते हैं। इसे निःशुल्क चिकित्सा के क्षेत्र में लोकप्रिय और सर्वत्र क्यों नहीं कहा जा सकता? तथ्य यह है कि ऐसा एचआईवी परीक्षण बहुत महंगा है और इसके लिए निम्नलिखित घटकों की आवश्यकता होती है:

• डीऑक्सीराइबोन्यूक्लिक एसिड का एक मैट्रिक्स, जिसमें प्रवर्धन के लिए डीएनए का एक खंड शामिल है;
• दो प्राइमर (प्रत्येक श्रृंखला खंड के लिए);
• वायरल कणों के पोलीमराइजेशन में तेजी लाने के लिए रासायनिक रूप से सक्रिय घटक पोलीमरेज़;
• डीऑक्सीराइबोन्यूक्लियोसाइड ट्राइफॉस्फेट;
• द्विसंयोजी मैग्नीशियम के कण (आवेशित);
• अनुकूल परिस्थितियाँ बनाने के लिए एक विशेष समाधान, अम्लता का उचित स्तर, नमक की सघनता, तरल में मैग्नीशियम कणों की संख्या प्रदान करना।

ध्यान! नमूने को ज़्यादा गरम होने से बचाने के लिए, सामग्री में थोड़ी मात्रा में पेट्रोलियम जेली मिलाई जाती है, जिसमें वसा होती है और, तदनुसार, एक उच्च क्वथनांक होता है।

विश्लेषण की सटीकता की अपेक्षाकृत उच्च दर इसकी बढ़ी हुई संवेदनशीलता के कारण है, जो अन्य वायरस के प्रति एंटीबॉडी की प्रतिक्रिया को उत्तेजित करती है।

एचआईवी के लिए पीसीआर तकनीक के फायदे और नुकसान

नीचे दी गई तालिका में विधि के वस्तुनिष्ठ मूल्यांकन के लिए, हम अध्ययन के कई फायदे और नुकसान प्रस्तुत करते हैं:

पेशेवरों

विपक्ष

- काफी उच्च सटीकता दर (80% मामलों में वायरस का पता लगाता है) - सार्वभौमिकता (अध्ययन के लिए न केवल रक्त का उपयोग किया जाता है, बल्कि योनि स्राव, शुक्राणु का भी उपयोग किया जाता है) - तरीकों की एक विस्तृत श्रृंखला (जैविक सामग्री के एक नमूने का परीक्षण कई बीमारियों के लिए किया जा सकता है) - परिणाम प्राप्त करने की गति (रोगी को अगले दिन उत्तर मिलता है - इस संबंध में एक्सप्रेस विधियां अधिक कुशल हैं) - उच्च संवेदनशीलता (एचआईवी विकास के शुरुआती चरणों में निदान संभव है, जिसे एलिसा या संक्रमण के लिए सामान्य रक्त परीक्षण के बारे में नहीं कहा जा सकता है) - कोई उम्र प्रतिबंध नहीं (एचआईवी के लिए ऐसा रक्त परीक्षण बच्चे से उसके जन्म के क्षण से लिया जा सकता है)

- उच्च कीमत - उच्च तकनीक वाले उपकरणों का उपयोग करने की आवश्यकता - 20% गलत सकारात्मक परिणाम (विधि की उच्च संवेदनशीलता के कारण)

जाहिर है, तकनीक के फायदे अधिक हैं। यदि हम आगे के उपचार की उत्पादकता और रोगी के जीवन को बढ़ाने की संभावना के संदर्भ में निदान के प्रकार का मूल्यांकन करते हैं, तो पीसीआर सफलता का सबसे निश्चित तरीका है।

विश्लेषण सुविधाएँ

वर्णित विश्लेषण की मुख्य विशेषता एचआईवी का शीघ्र निदान करने की क्षमता है, जो अन्य शोध विधियां सक्षम नहीं हैं। कथित संक्रमण के कितने दिन बाद मैं पीसीआर के लिए रक्तदान कर सकता हूं? आमतौर पर यह समयावधि 10-14 दिनों की होती है. अगले 24 घंटों के भीतर, रोगी को परिणाम प्राप्त हो जाता है। शर्तों में संभावित विचलन को नैदानिक ​​​​केंद्रों और क्लीनिकों की व्यक्तिगत कार्य स्थितियों द्वारा समझाया गया है।

इस अध्ययन का उद्देश्य

पीसीआर ज्यादातर एचआईवी (ह्यूमन इम्युनोडेफिशिएंसी सिंड्रोम) का पता लगाने के लिए किया जाता है। हालाँकि, यदि आपको यौन संचारित रोगों के विकास का संदेह है तो विश्लेषण भी लिया जा सकता है। वंशानुगत रोगों के निदान के मामले में भी यही विधि लागू होती है।

पीडीआर डायग्नोस्टिक्स: संचालन के कारण

मुझे पीसीआर के लिए रक्तदान कब करना चाहिए? ज्यादातर मामलों में, जैविक सामग्री तब दान की जाती है जब मानव इम्युनोडेफिशिएंसी वायरस शरीर की स्थितियों के अनुकूल हो जाता है, एंटीबॉडी के उत्पादन को उत्तेजित करता है और एचआईवी के पहले लक्षणों का कारण बनता है। हालाँकि, यह तभी उचित है जब संक्रमण के बाद पर्याप्त समय बीत चुका हो और इसमें एलिसा शामिल हो।

पीसीआर की आवश्यकता उस रोगी की पहल पर उत्पन्न होती है जो रोग का तुरंत निदान करना चाहता है (यदि कोई हो)। इसका कारण हो सकता है: असुरक्षित संभोग, किसी संक्रमित व्यक्ति की जैविक सामग्री के साथ संपर्क, हाल ही में रक्त आधान, आदि।

पीसीआर को किसे नियुक्त किया गया है?

किसी विशेषज्ञ की सिफारिश पर पीसीआर द्वारा एचआईवी संक्रमण का निर्धारण निम्नलिखित मामलों में किया जाता है:

• प्रारंभिक निदान.पीसीआर एलिसा परिणाम की सटीक पुष्टि या खंडन करता है;
• वेस्टर्न ब्लॉटिंग ने निदान की पुष्टि की. इम्यूनोब्लॉटिंग एड्स का अध्ययन करने का एक अतिरिक्त तरीका है . दोनों विधियों का एक साथ उपयोग किया जाता है, जिससे गलत निदान करने की संभावना समाप्त हो जाती है;
• पुष्टि की गई एचआईवी स्थिति के साथपीसीआर का उपयोग करके, चयनित उपचार के प्रभाव की निगरानी की जाती है;
• दाता रक्त परीक्षण के लिएएचआईवी एंटीबॉडी की उपस्थिति के लिए;
• माँ के सकारात्मक होने पर नवजात शिशु की एचआईवी स्थिति निर्धारित करने के लिए। जीवन के पहले दिनों में पीसीआर आपको जन्म नहर से गुजरने के दौरान शिशु के अंतर्गर्भाशयी संक्रमण या संक्रमण का निर्धारण करने की अनुमति देता है। परीक्षण जन्म के 2-3 सप्ताह बाद किया जाता है।

पीसीआर विश्लेषण में कितना समय लगता है और इसे कहाँ लिया जा सकता है?

एचआईवी के लिए पीसीआर विश्लेषण एक विशेष प्रयोगशाला में किया जाता है। परीक्षण और परिणाम की व्याख्या के लिए अधिक समय की आवश्यकता नहीं होती है: एक महीना या एक सप्ताह। खून निकालने में 6 मिनट तक का समय लगता है। सामान्य मामले में, किसी विशेषज्ञ को निदान करने और निष्कर्ष निकालने में एक दिन से अधिक की आवश्यकता नहीं होगी। पहले 8 घंटे रक्त का अध्ययन करते हैं, शेष समय पंजीकरण पर खर्च किया जाता है। नमूना लेने के अगले दिन ही परिणाम सामने आ सकता है। एक्सप्रेस परीक्षण की अवधि 2 घंटे है।

ध्यान! अनिवार्य चिकित्सा बीमा पॉलिसी किसी सार्वजनिक स्वास्थ्य संस्थान में निःशुल्क परीक्षण पास करना संभव बनाती है।

लगभग कोई भी व्यावसायिक प्रयोगशाला गुमनाम आधार पर अनुसंधान करने में सक्षम है। एक व्यक्ति को एक विशेष नंबर दिया जाता है, जिससे परिणाम जुड़े होते हैं। यह जानकारी उपयोगकर्ता के व्यक्तिगत खाते में संस्थान की वेबसाइट पर अपलोड की जाती है।

पीसीआर टेस्ट लेने में कितना खर्च आता है?

शोध करने का यह तरीका काफी महंगा है। यह इस तथ्य के कारण है कि नवीनतम चिकित्सा उपकरण पर पीसीआर करना आवश्यक है, हेरफेर के लिए विशेषज्ञों से पर्याप्त ज्ञान की आवश्यकता होती है।

एक अत्यावश्यक प्रश्न: किसी व्यक्ति को एचआईवी के लिए पीसीआर परीक्षण कराने में कितना खर्च आता है? इसके लिए करीब 56-60 डॉलर की जरूरत होगी.

एक विश्लेषण का आयोजन

एचआईवी के लिए पीसीआर परीक्षण आयोजित करने में शामिल हैं:

• अनुसंधान के लिए रक्त का नमूना लेना;
• एक पुरुष से शुक्राणु और एक महिला से जननांग स्राव का अतिरिक्त नमूना।

ध्यान! परिणामस्वरूप, परीक्षण डॉक्टरों को रोगी की स्थिति की निगरानी के लिए उच्च वायरल लोड निर्धारित करने की अनुमति देता है।

विचार करने योग्य इस एचआईवी परीक्षण की अन्य विशेषताएं:

• परीक्षण से कुछ दिन पहले, रोगी को आहार में वसायुक्त खाद्य पदार्थों की मात्रा कम करनी चाहिए;
• रक्त का नमूना खाली पेट लिया जाता है;
• विभिन्न संक्रमणों को संश्लेषित करने वाले एंजाइमों को एक विशेष रिएक्टर में विभाजित जैविक सामग्रियों में जोड़ा जाता है;
• विश्लेषण कई चरणों में किया जाता है, क्योंकि अणुओं का विभाजन अंकगणितीय प्रगति में होता है। एक विशेष कार्यक्रम एचआईवी का पता लगाने के लिए बड़ी संख्या में कोशिका संरचनाओं की तुलना करता है।

सटीक निदान विधियां, जिनमें पीसीआर शामिल है, महंगी हैं, लेकिन एचआईवी का शीघ्र पता लगा सकती हैं। ऐसी विकृति के उपचार में सबसे महत्वपूर्ण बात सही और समय पर निदान है, जो मानव जीवन की गुणवत्ता और उसकी अवधि में सुधार कर सकती है।

अधिकांश महिलाओं और पुरुषों के लिए यह यौन संचारित रोग सबसे अधिक भयभीत करने वाला होता है। इस कारण से, बाधा गर्भनिरोधक के बिना आकस्मिक अंतरंग संबंध के बाद, साथ ही यौन साझेदारों के बार-बार परिवर्तन और सर्जिकल ऑपरेशन के बाद, एक उचित व्यक्ति एक निश्चित सतर्कता का अनुभव करता है। स्पष्ट करने का सबसे विश्वसनीय तरीका क्लिनिक में जाना और एचआईवी के लिए पीसीआर परीक्षण कराना है।

रक्त परीक्षण का उपयोग निम्नलिखित संकेतक निर्धारित करने के लिए किया जा सकता है:

• अव्यक्त अवधि में एचआईवी की उपस्थिति से इनकार / पुष्टि (संक्रमण के बाद पहले हफ्तों में, उनकी अनुपस्थिति या बहुत कम एकाग्रता के कारण एलिसा परीक्षणों में एंटीबॉडी का पता नहीं लगाया जाता है)।
• एचआईवी-1, एचआईवी-2 के जीनोटाइप का निर्धारण।
• वाहक माताओं से पैदा हुए बच्चों में स्थिति की पहचान (एचआईवी संक्रमित महिलाओं से पैदा हुए सभी बच्चों में एचआईवी के प्रति एंटीबॉडी लंबे समय तक पाए जाते हैं। 48 वर्ष से कम उम्र के बच्चों में वायरस के डीएनए का निर्धारण करना वांछनीय है। जीवन के घंटे, 1-2 महीने, 3- 6 महीने)।
• एलिसा परीक्षण के गलत-नकारात्मक, गलत-सकारात्मक और संदिग्ध परिणाम।
• एचआईवी की मात्रा का निदान और गतिशीलता में वायरल लोड में परिवर्तन की निगरानी (एड्स के पहले से ही स्थापित निदान के मामले में, पीसीआर विश्लेषण का उपयोग पूर्वानुमान, गतिशील निगरानी और चल रही चिकित्सा की निगरानी के लिए किया जाता है)।

एचआईवी के लिए पीसीआर परीक्षण की कीमत

तरीकों	पीसीआर विश्लेषण का प्रकार	कीमत
एचआईवी टाइप 1 डीएनए	गुणात्मक	2 750
प्लाज्मा में एचआईवी टाइप 1 आरएनए	मात्रात्मक	8 850
एचआईवी आरएनए, प्रोटीज़ और रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस अवरोधकों के लिए एचआईवी प्रतिरोध का निर्धारण ("प्लाज्मा में एचआईवी आरएनए" के साथ क्रमबद्ध)	-	16 550
एचआईवी आरएनए, इंटीग्रेज अवरोधकों के लिए एचआईवी प्रतिरोध का परीक्षण ("प्लाज्मा में एचआईवी आरएनए" के साथ आदेशित)	-	16 950
एचआईवी-1 आरएनए/डीएनए, एचआईवी ट्रॉपिज़्म निर्धारण	-	16 950
मल्टीप्राइम अध्ययन
हेपेटाइटिस सी आरएनए + हेपेटाइटिस बी डीएनए + एचआईवी टाइप 1 और 2 आरएनए (अल्ट्रासेंसिटिव विधि)	गुणात्मक	3 800

एचआईवी के लिए पीसीआर विश्लेषण - यह कब, क्यों और किस समय किया जाता है

1. एचआईवी डीएनए.ह्यूमन इम्यूनोडेफिशिएंसी वायरस (एचआईवी) डीएनए डायग्नोस्टिक्स का उपयोग उच्च जोखिम वाली घटना के बाद संभावित संक्रमण का शीघ्र पता लगाने के लिए किया जा सकता है (संभावित संक्रमण के 10 दिन बाद ही रक्त परीक्षण किया जाता है)। हालाँकि, संक्रमण को पूरी तरह से बाहर करने के लिए, बाद में 4 और 12 सप्ताह में दूसरा अध्ययन और एलिसा डायग्नोस्टिक्स आयोजित करना आवश्यक है।
   विश्लेषण परिणाम: एचआईवी डीएनए (गुणात्मक विश्लेषण)- "नहीं मिला" या "मिला"। बाद के मामले में, एचआईवी संक्रमण की पुष्टि के लिए बार-बार अतिरिक्त अध्ययन की आवश्यकता होती है। यदि परिणाम नकारात्मक है, लेकिन संक्रमण का खतरा अधिक है, तो दूसरी जांच आवश्यक है - थोड़ी देर बाद पीसीआर या एलिसा द्वारा रक्तदान।
2. एचआईवी आरएनए.पीसीआर (तथाकथित "वायरल लोड") द्वारा एचआईवी आरएनए का मात्रात्मक निर्धारण एचआईवी संक्रमण के पाठ्यक्रम के पूर्वानुमान और एंटीवायरल थेरेपी की प्रभावशीलता के शुरुआती संकेतक का आकलन करने के लिए संकेतकों में से एक है। परीक्षण को बीमारी के पाठ्यक्रम की निगरानी करने, उपचार शुरू करने का निर्णय लेने और इसकी प्रभावशीलता का मूल्यांकन करने के लिए संकेत दिया जाता है।
   पीसीआर द्वारा एचआईवी आरएनए का अध्ययन वयस्कों में उच्च जोखिम वाले एपिसोड (संभावित संक्रमण के लगभग 7-10 दिन बाद) के बाद संभावित संक्रमण के शुरुआती विश्वसनीय निदान के साथ किया जा सकता है। एंटीबॉडी की अनुपस्थिति में एचआईवी आरएनए के उच्च अनुमापांक की उपस्थिति तीव्र एचआईवी संक्रमण के निदान की अनुमति देती है। हालाँकि, निदान को स्पष्ट करने के लिए, 1 और 3 महीने के भीतर बार-बार अध्ययन और एलिसा डायग्नोस्टिक्स आयोजित करना आवश्यक है।
   इस संक्रमण वाली गर्भवती महिलाओं में जन्म की अपेक्षित तिथि से 3-4 सप्ताह पहले पीसीआर एचआईवी आरएनए की डिलीवरी डिलीवरी की विधि (प्राकृतिक जन्म नहर के माध्यम से या सिजेरियन सेक्शन के माध्यम से) के मुद्दे को हल करने के लिए संकेतित है।
   विश्लेषण परिणाम: एचआईवी टाइप 1 एचआईवी आरएनए (मात्रात्मक विश्लेषण)- "पता नहीं चला" (यह सामान्य है)।
3. एचआईवी प्रतिरोध.प्रोटीज और रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस अवरोधकों के प्रति एचआईवी के प्रतिरोध को निर्धारित करने के लिए एक विश्लेषण एचआईवी संक्रमित रोगियों के लिए अप्रभावी चिकित्सा के साथ-साथ एंटीवायरल उपचार शुरू करने से पहले एक तीव्र संक्रमण के दौरान संकेत दिया गया है। अध्ययन आपको दवाओं के प्रति एचआईवी के प्रतिरोध को निर्धारित करने की अनुमति देता है। विश्लेषण के परिणामों के आधार पर, संक्रामक रोग विशेषज्ञ प्रोटीज अवरोधकों, न्यूक्लियोसाइड और गैर-न्यूक्लियोसाइड रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस अवरोधकों के प्रतिरोध उत्परिवर्तन की उपस्थिति के बारे में सीखते हैं, साथ ही दवा प्रतिरोध उत्परिवर्तन से जुड़े प्रत्येक अमीनो एसिड स्थिति के बारे में जानकारी भी प्राप्त करते हैं।
4. मल्टीप्राइम व्यापक निदान:हेपेटाइटिस सी वायरस आरएनए/हेपेटाइटिस बी वायरस डीएनए/ह्यूमन इम्युनोडेफिशिएंसी वायरस (एचआईवी) टाइप 1 और 2 आरएनए (अल्ट्रासेंसिटिव विधि) का गुणात्मक निर्धारण। विश्लेषण प्रारंभिक चरण में एचआईवी संक्रमण, वायरल हेपेटाइटिस सी और बी का निदान करने की अनुमति देता है। यह अध्ययन जोखिम वाले व्यक्तियों में वायरल हेपेटाइटिस बी और सी, एचआईवी प्रकार 1/2 का शीघ्र पता लगाने के लिए संकेत दिया गया है। डीएनए या आरएनए वायरस का पता लगाना संक्रमण का संकेत देता है।

इन रक्त परीक्षणों की तैयारी की शर्तें - 3 से 7 कैलेंडर दिनों तक। आप मॉस्को में हमारे मेडिकल सेंटर में एचआईवी संक्रमण के निदान के लिए गुणात्मक और मात्रात्मक पीसीआर विश्लेषण पास कर सकते हैं। रक्त का नमूना प्रतिदिन 10-00 तक, सहित

WHO के आँकड़ों के अनुसार, पिछले 40 वर्षों में एड्स से 25 मिलियन लोगों की मृत्यु हो चुकी है। इस संक्रमण से होने वाला नुकसान बहुत बड़ा है। सबसे ज्यादा संक्रमित अफ्रीका में निकले, जहां से यह संक्रमण आया। एचआईवी के साथ, रोग का निदान विशेष रूप से प्रासंगिक हो जाता है। सच है, एचआईवी के उपचार के लिए अभी तक कोई दवा नहीं है, लेकिन प्रारंभिक चिकित्सा रोगी के जीवन को लम्बा खींच सकती है और उसकी गुणवत्ता में सुधार कर सकती है।

एचआईवी संक्रमण का निदान

एचआईवी संक्रमण का निर्धारण विभिन्न चरणों में निम्नलिखित विधियों द्वारा किया जाता है:

• एलिसा - एंजाइम इम्यूनोपरख।
• पश्चिमी ब्लॉट।
• पीसीआर - पोलीमरेज़ श्रृंखला प्रतिक्रिया।
• एक्सप्रेस परीक्षण.

पीसीआर विधि अमेरिकी बायोकेमिस्ट कैरी मुलिस द्वारा विकसित की गई थी, जिन्हें इसके लिए 1983 में नोबेल पुरस्कार मिला था। आज, सभी संक्रमणों के निदान में चिकित्सा में इस पद्धति को इसकी सटीकता और सूचना सामग्री के कारण अग्रणी माना जाता है। इस संबंध में एचआईवी कोई अपवाद नहीं है।

विश्लेषण का सार

प्रत्येक जीवित कोशिका में आरएनए और डीएनए होते हैं। ये न्यूक्लिक एसिड स्व-प्रतिलिपि और स्व-प्रतिकृति में सक्षम हैं। प्रत्येक संक्रमण के लिए, डीएनए टुकड़े अद्वितीय होते हैं। न्यूक्लिक एसिड के ये टुकड़े जैविक तरल पदार्थों में घूमते हैं। उन्हें विशेष उपकरण - रिएक्टर - द्वारा पकड़ लिया जाता है और पहचाना जाता है। यही विधि का आधार है. प्रयोगशाला सहायक इन टुकड़ों को गिनता है। आरएनए के लिए रेट्रोवायरस एचआईवी की निगरानी की जाती है। यहां तक ​​कि वायरल कणों की एकल प्रतियों के साथ भी, पीसीआर उनका पता लगा सकता है और उनकी गिनती कर सकता है।

शिरापरक रक्त का उपयोग आमतौर पर परीक्षण द्रव के रूप में किया जाता है। विधि के विशेष घटक वायरस कणों के संपर्क में आते हैं और उन्हें पता लगाने योग्य बनाते हैं, क्योंकि पाए गए टुकड़ों में कई गुना वृद्धि होती है।

एचआईवी के मामले में, वायरस की उपस्थिति का परिणाम क्लिनिक में आने से बहुत पहले प्राप्त किया जा सकता है। इसलिए, अपनी उच्च संवेदनशीलता के कारण, पीसीआर का इतना उच्च नैदानिक ​​मूल्य है। पीसीआर का एक बड़ा लाभ विधि की बहुमुखी प्रतिभा है। पीसीआर के लिए संक्रमण की ऊष्मायन अवधि कोई बाधा नहीं है।

अनुसंधान लागत

पीसीआर विधि काफी महंगी है. यह इसका एक बड़ा नुकसान है. इसके लिए नवीनतम उपकरण और उच्च योग्य प्रयोगशाला सहायक की आवश्यकता होती है। पूर्वगामी को ध्यान में रखते हुए, छोटी बस्तियों में पीसीआर डायग्नोस्टिक्स नहीं किया जाता है। आप विश्लेषण केवल विशेष बड़े क्लीनिकों में ही ले सकते हैं।

मॉस्को क्लीनिक में एचआईवी डीएनए का निर्धारण करने की लागत 2,800 रूबल से है, पीसीआर का उपयोग करके वायरल लोड (प्लाज्मा में वायरल आरएनए) का निर्धारण - 8,800 रूबल से, और प्रोटीज अवरोधकों के लिए एचआईवी प्रतिरोध - 16,500 रूबल से। जैसा कि आप देख सकते हैं, कीमतें काफी अधिक हैं। एमएचआई नीति के तहत सार्वजनिक क्लीनिकों में पीसीआर नि:शुल्क किया जा सकता है। यह महत्वपूर्ण है कि प्रक्रिया गुमनाम रूप से की जा सके। रजिस्ट्री में मरीज को एक नंबर मिलता है जिससे वह परिणाम जान सकता है। आधुनिक चिकित्सा केंद्रों में ग्राहकों के व्यक्तिगत खाते हैं जहां ये डेटा दर्ज किया जाएगा।

अनुसंधान के उद्देश्य

एचआईवी के लिए पीसीआर डायग्नोस्टिक्स ऐसे मामलों में निर्धारित है:

• अंतर्गर्भाशयी संक्रमण का निर्धारण करने के लिए बीमार मां या वाहक से पैदा हुए बच्चे में संक्रमण का पता लगाना।
• यदि एलिसा ने संदिग्ध परिणाम दिए हैं (एचआईवी के लिए पीसीआर इस मामले में अंतिम निदान करने में मदद करता है)।
• शरीर में वायरस की मात्रात्मक सामग्री निर्धारित करने के लिए।
• सकारात्मक इम्युनोब्लॉटिंग के साथ, वे पीसीआर के साथ एक दूसरे के पूरक हैं।
• दाता परीक्षण.
• एचआईवी के शीघ्र निदान के लिए.
• एआरटी की प्रभावशीलता और प्रतिरोध का निर्धारण करना।

इस विश्लेषण का लाभ यह है कि एचआईवी के लिए पीसीआर एक वर्ष से कम उम्र के बच्चों के लिए भी किया जा सकता है।

अध्ययन अक्सर प्राथमिक निदान के लिए नहीं, बल्कि उपचार की प्रक्रिया में किया जाता है। प्राथमिक निदान सीरोलॉजिकल अध्ययन है (वे एचआईवी के प्रति एंटीबॉडी का स्तर निर्धारित करते हैं)। यदि गलत-सकारात्मक परिणाम दोहराया जाता है - तो यह कम वायरल लोड के साथ हो सकता है।

पीसीआर एचआईवी का निदान तब करता है जब इसमें अभी तक कोई एंटीबॉडी नहीं होती है। इस मामले में एलिसा विधि कोई उत्तर नहीं देगी।

और एचआईवी पर पीटीएसआर पहले से ही सकारात्मक होगा। लेकिन एचआईवी की इस अवधि के लक्षण विशिष्ट नहीं हैं। मरीज को पहले एक सामान्य चिकित्सक द्वारा एआरवीआई का लंबे समय तक और असफल इलाज किया जाता है। यह ध्यान में रखा जाना चाहिए कि केवल पीसीआर के आधार पर एचआईवी का निदान नहीं किया जाता है, अन्य व्यापक परीक्षणों को पास करना आवश्यक है। जटिल मामलों के लिए पीसीआर विधि अक्सर सहायक होती है।

विश्लेषण की तैयारी

एचआईवी के लिए पीसीआर लेने से 2 दिन पहले, आपको वसायुक्त भोजन, शराब नहीं खाना चाहिए। मानसिक और शारीरिक रूप से तनाव न लेना भी बेहतर है। यदि रोगी को इम्यूनोस्टिम्यूलेशन का एक कोर्स निर्धारित किया जाता है, तो विश्लेषण से 2 सप्ताह पहले इसे रोक दिया जाता है।

सुबह के समय रक्तदान करना सबसे अच्छा होता है। शरीर के अन्य जैविक तरल पदार्थ (शुक्राणु, योनि स्राव) की भी जांच की जा सकती है, लेकिन रक्त सबसे अच्छा पदार्थ है। लार, पसीना, मूत्र और आँसू का उपयोग नहीं किया जाता है, क्योंकि उनमें वायरस की मात्रा न्यूनतम होती है।

एचआईवी के लिए पीसीआर के लाभ

विधि के फायदे झूठे सकारात्मक परिणाम की बेहद कम संभावना, शरीर के किसी भी जैविक तरल पदार्थ के लिए प्रतिक्रिया की सार्वभौमिकता हैं। विश्लेषण की एक विस्तृत श्रृंखला है:

• विभिन्न संक्रमणों का पता लगाने के लिए एक रक्त नमूने का उपयोग किया जा सकता है।
• तकनीक अत्यावश्यक है, परिणाम अगले ही दिन तैयार हो जाता है।
• विश्वसनीयता 85 से 98% तक होती है।
• एचआईवी की उपस्थिति संक्रमण के 10-14 दिन बाद निर्धारित की जा सकती है (इस समय अभी तक कोई एंटीबॉडी नहीं हैं)।
• कोई आयु प्रतिबंध नहीं है, इसे जन्म के क्षण से तुरंत लागू किया जा सकता है।

विधि के विपक्ष

पीसीआर के नुकसान इस प्रकार हैं:

• महँगा विश्लेषण.
• अत्याधुनिक चिकित्सा उपकरणों की जरूरत है.
• प्रयोगशाला सहायक और विश्लेषण करने वाले डॉक्टर की उच्च योग्यता आवश्यक है।
• प्रतिक्रिया अत्यधिक संवेदनशील है, इसलिए त्रुटि 20% हो सकती है।
• यदि रोगी को ऑटोइम्यून प्रक्रियाएं, ऑन्कोलॉजी और क्रोनिक संक्रमण हैं तो गलत सकारात्मक परिणाम प्राप्त हो सकता है।
• प्रयोगशाला परिसर की विशेष साफ-सफाई जरूरी है, क्योंकि हवा से वायरस विश्लेषण में आ सकता है। तो परिणाम ग़लत होगा.

पीसीआर का संचालन करने वाली प्रयोगशालाओं के लिए, निदान की गुणवत्ता में सुधार के लिए, आंतरिक नियंत्रण के लिए SanPiN प्रणाली के लिए विशेष सख्त उपाय विकसित किए गए हैं। इसके अलावा, इस तकनीक के साथ काम करने के सभी नियमों का पालन किया जाना चाहिए:

• टेस्ट ट्यूब पर दी गई जानकारी का कड़ाई से पालन करना आवश्यक है।
• रक्त लेने से पहले, दोबारा देखें और सुनिश्चित करें कि विश्लेषण का आदेश दिया गया है।
• नर्स को ट्यूबों की सही लेबलिंग करनी चाहिए।
• क्रॉस-संदूषण को रोकने के लिए प्रयोगशाला चिकित्सक को बायोमटेरियल के साथ सभी हेरफेर सही ढंग से करना चाहिए।
• परीक्षण प्रणाली उत्कृष्ट गुणवत्ता की होनी चाहिए।

यदि ये सभी शर्तें पूरी होती हैं, तो उत्तर में त्रुटि केवल 2% प्रकरणों में ही हो सकती है।

विश्लेषण अवधि

कई लोग इस बात में रुचि रखते हैं कि एचआईवी के लिए पीसीआर कब तक तैयार हो जाएगा। निदान 8 घंटे से अधिक नहीं रहता है। रोगी को अगले ही दिन उत्तर मिल सकता है। एक्सप्रेस परीक्षण 2 घंटे के भीतर किया जाता है।

पीसीआर की विश्वसनीयता

कई फायदों के बावजूद, पीसीआर को एक आदर्श निदान पद्धति नहीं माना जाता है। यदि शरीर में एचआईवी की उपस्थिति के लिए स्क्रीनिंग परीक्षण प्राप्त करना आवश्यक हो तो वे उसके पास जाते हैं।

विश्लेषण के लिए रक्त कब लिया जाता है?

एचआईवी के लिए पीसीआर कितने समय तक लेना चाहिए? कथित संक्रमण के 4-4 दिन बाद रक्त लेने पर पहले से ही एक विश्वसनीय परिणाम प्राप्त किया जा सकता है। 2 सप्ताह के बाद, एचआईवी के लिए विश्वसनीयता 98% होगी, और 5 दिनों की अवधि के साथ - 80%। परिणाम पर पीसीआर की उपस्थिति विश्वसनीय होगी, लेकिन बिल्कुल सटीक परिणाम के लिए एलिसा भी किया जाता है।

एलिसा विश्लेषण केवल वायरस के प्रति एंटीबॉडी की उपस्थिति में प्रभावी होगा, इसमें 1-3 महीने से छह महीने तक का समय लग सकता है। चूंकि एलिसा उच्च संभावना (98% -99.9%) देता है, इसलिए पीसीआर को एचआईवी संक्रमण की उपस्थिति के लिए 100% पुष्टिकरण परीक्षण नहीं कहा जा सकता है। लेकिन दूसरी ओर, यह एकमात्र ऐसी तकनीक है जिसमें एंटीबॉडी के प्रकट होने का इंतजार करना जरूरी नहीं है।

एचआईवी के साथ, पीसीआर एआरटी की प्रभावशीलता, एचआईवी रोग के चरण और वीएन की संख्या (शरीर में एचआईवी की उपस्थिति का एक मात्रात्मक मूल्यांकन) के बारे में जानकारी प्रदान कर सकता है। यह परिवर्तनों की गंभीरता और सीमा को इंगित करेगा।

यदि रक्त में एंटीबॉडी हैं तो एचआईवी के लिए पीसीआर परीक्षण करना भी आवश्यक है, लेकिन उनकी उपस्थिति चिकित्सकीय रूप से एचआईवी संक्रमण की विश्वसनीयता का संकेत नहीं देती है।

न केवल संक्रमण और आकस्मिक संभोग के मामले में विश्लेषण पास करें। अन्य कारण:

• गर्भधारण की योजना बनाना.
• आगामी ऑपरेशन.
• कैज़ुअल सेक्स.
• कुछ व्यवसायों को काम पर प्रवेश (शिक्षक, डॉक्टर और अन्य चिकित्सा कर्मियों) के लिए इस विश्लेषण की आवश्यकता होती है।
• कैदी.
• टीबी के मरीज.
• आपातकालीन स्थिति मंत्रालय और पुलिस के कर्मचारी।
• विदेशी देशों से छुट्टी के बाद लौटे (यदि आप यह सुनिश्चित करना चाहते हैं कि कोई संक्रमण न हो)।
• वेश्याएँ।
• विदेशी छात्र।
• दवाओं का आदी होना।

इसके अलावा, किसी मरीज में कुछ लक्षण एचआईवी परीक्षण को मजबूर कर सकते हैं:

• अचानक वजन कम होना.
• 3 सप्ताह से अधिक समय तक रहने वाला दस्त।
• लंबे समय तक तापमान में अनुचित वृद्धि।
• बढ़े हुए लिम्फ नोड्स.
• निमोनिया, कैंडिडिआसिस आदि का अस्पष्ट कारण।

विश्लेषण को समझना उपस्थित चिकित्सक का विशेषाधिकार है, न कि प्रयोगशाला सहायक का।

पीसीआर या एलिसा, कौन सा बेहतर है?

आरएनए के साथ, वायरस का गुणात्मक और मात्रात्मक दोनों तरह से पता लगाया जाता है। यह विश्लेषण स्पष्ट रूप से एक विशिष्ट रोगज़नक़ की पहचान करता है, भले ही कई क्रॉस-रिएक्टिंग रोगजनक हों। जैविक सामग्री का उपयोग सूखे रूप में भी किया जा सकता है। नकारात्मक पक्ष पीसीआर की उच्च संवेदनशीलता है, जब उपकरणों या टेस्ट ट्यूब पर विदेशी डीएनए की थोड़ी मात्रा की उपस्थिति से भी गलत सकारात्मक परिणाम दिया जा सकता है।

एलिसा का कार्य और संभावना रेट्रोवायरस के प्रति एंटीबॉडी की उपस्थिति का निर्धारण करना है। हालाँकि इसकी सटीकता 99% है, लेकिन यह शुरुआती चरणों में लागू नहीं होती है।

गुणात्मक एचआईवी परीक्षण

एचआईवी के लिए उच्च गुणवत्ता वाली पीसीआर का संचालन शरीर में वायरस की उपस्थिति निर्धारित करता है। इस मामले में परिणाम इस तरह दिखेंगे: सकारात्मक, गलत सकारात्मक, नकारात्मक। लेकिन इस अध्ययन से रेट्रोवायरस की मात्रा के बारे में जानकारी नहीं मिलेगी. ऐसा गुणात्मक विश्लेषण अनुचित है जब एचआईवी संक्रमण पहले से ही अन्य तरीकों से शरीर में पाया जा चुका हो।

उच्च गुणवत्ता वाले पीसीआर के साथ उपचार की प्रभावशीलता को नियंत्रित करना असंभव है।

मात्रात्मक एचआईवी परीक्षण

यह केवल एचआईवी संक्रमित लोगों द्वारा जैविक उत्पाद में वायरस आरएनए की प्रतियों की संख्या की गणना करने के लिए किया जाता है।

इस तरह के अध्ययन का उद्देश्य चल रहे उपचार की निगरानी करना और वायरस के प्रतिरोध की पहचान करना है। ऐसी गणना में एंटीवायरल थेरेपी डॉक्टर द्वारा आँख बंद करके निर्धारित नहीं की जाती है, इसलिए यह अधिक प्रभावी होगी। एचआईवी संक्रमण के लिए मात्रात्मक पीसीआर बहुत अधिक बार किया जाता है। यह विश्लेषण रक्त की प्रति/एमएल के रूप में प्रदर्शित किया जाता है।

क्या परिणाम दिए जा सकते हैं:

• वायरस का आरएनए नहीं है या बहुत कम है (लगभग 20 प्रतियां/एमएल)। कोई निश्चित निदान नहीं है.
• 20 - से 10 से 6ठी डिग्री प्रतियाँ/एमएल - निदान विश्वसनीय है।
• 10 से 6वीं प्रतियों/एमएल से अधिक - बड़ा वीएन।

प्रयोगशालाएँ एचआईवी के लिए वास्तविक समय पीसीआर परीक्षण कर सकती हैं। इसका तात्पर्य परिणामों की स्वचालित रिकॉर्डिंग के साथ पीसीआर उत्पादों के संचय का अवलोकन और संख्यात्मक मूल्यांकन है।

पीसीआर (पॉलीमरेज़ चेन रिएक्शन) आणविक आनुवंशिकी की एक विधि है जो आपको किसी भी छोटे डीएनए (या आरएनए) अनुक्रम का विश्लेषण करने की अनुमति देती है, यहां तक ​​​​कि डीएनए या आरएनए की सबसे छोटी मात्रा वाले नमूनों में भी, जिससे रोगजनक एजेंट की उपस्थिति / अनुपस्थिति का निर्धारण होता है ( उदाहरण के लिए, निर्धारित करें कि क्या मनुष्यों में एचआईवी या हेपेटाइटिस बी वायरस या माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस है)। पीसीआर का उपयोग विश्लेषण के लिए डीएनए या आरएनए के चयनित अनुभागों को पुन: उत्पन्न/गुणित/क्लोन (प्रवर्धित) करने के लिए किया जाता है।

पीसीआर विधि इतनी सरल है कि एक स्कूली छात्र भी इसका उपयोग कर सकता है)

पहले, डीएनए प्रवर्धन में बैक्टीरिया में अभिव्यक्ति के लिए वैक्टर में रुचि के खंडों की क्लोनिंग शामिल थी और इसमें कई सप्ताह लग जाते थे। लेकिन अब जब पीसीआर टेस्ट ट्यूब में किया जाता है, इसमें केवल कुछ घंटे लगते हैं. पीसीआर है अत्यधिक कुशल, इसलिए डीएनए से बड़ी संख्या में प्रतियां बनाई जा सकती हैं।

डीएनए अनुक्रम और न्यूक्लियोटाइड पत्राचार।

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इसके अलावा, पीसीआर उन्हीं अणुओं का उपयोग करता है जिनका उपयोग प्रकृति डीएनए की प्रतिलिपि बनाने के लिए करती है:

• दो "प्राइमर", छोटे एकल-फंसे डीएनए अनुक्रम जिन्हें कॉपी किए जाने वाले डीएनए खिंचाव की शुरुआत और अंत से मेल खाने के लिए संश्लेषित किया जाता है।
• पोलीमरेज़ नामक एक एंजाइम जो डीएनए के एक खंड के साथ यात्रा करता है, उसका कोड पढ़ता है और एक प्रति इकट्ठा करता है।
• डीएनए ब्लॉकों का एक समूह जिसे इस पोलीमरेज़ को बनाने की आवश्यकता होती है।

अर्थात्, पीसीआर एक ऐसी तकनीक है जिसमें डीएनए कणों (कभी-कभी आरएनए) को एक निश्चित समाधान में या एक विशेष सतह पर गुणा किया जाता है जहां उन्हें जमा किया जा सकता है।

पीसीआर एक ऐसी तकनीक है जिसके द्वारा वैज्ञानिक भूसे के ढेर में एक सुई ढूंढ सकते हैं और फिर उन सुइयों से भूसे का ढेर बना सकते हैं।

एक विधि के रूप में पीसीआर का कार्य गुणा करना (प्रवर्धित करना) है, उनकी जितनी संभव हो उतनी प्रतियां बनाना है ताकि यह पहचाना जा सके कि वे किससे संबंधित हो सकते हैं (एक निश्चित व्यक्ति, जानवर या रोगजनक जीव), भले ही केवल निशान हों डीएनए/आरएनए का.

हालाँकि, पीसीआर प्रवर्धन नैदानिक ​​परीक्षण का केवल एक हिस्सा है। प्रवर्धन के बाद, प्रवर्धित खंड अन्य न्यूक्लियोटाइड खंडों के साथ तुलना की जानी चाहिए, लेकिन एक ज्ञात स्रोत से(उदाहरण के लिए, एक विशिष्ट व्यक्ति, जानवर, या रोगज़नक़)। अद्वितीय खंडों की यह तुलना अक्सर एक विशेष जेल में मनुष्यों, रोगजनकों या अन्य स्रोतों से ज्ञात न्यूक्लियोटाइड अनुक्रमों के बगल में पीसीआर-जनित न्यूक्लियोटाइड अनुक्रमों को रखकर की जाती है।

जब जेल के माध्यम से विद्युत धारा प्रवाहित की जाती है, तो विभिन्न न्यूक्लियोटाइड अनुक्रम बैंड बनाते हैं जो उनके विद्युत आवेश और आणविक आकार के अनुसार "सीढ़ी" के समान होते हैं। इसे जेल वैद्युतकणसंचलन कहा जाता है। वे समान न्यूक्लियोटाइड अनुक्रम दिखाते हुए, जेल में समान स्तर पर चले जाते हैं। यह विधि सबसे लोकप्रिय अंतिम-चरण पीसीआर परीक्षणों में से एक है।

पीसीआर कैसे काम करता है?

1983 में, कारी मुलिस ने डीएनए अनुक्रमों को बढ़ाने के लिए बुनियादी कदम विकसित किए। उन्हें और माइकल स्मिथ को 1993 में पीसीआर के लिए नोबेल पुरस्कार से सम्मानित किया गया था।

पीसीआर एक टेस्ट ट्यूब में उपयुक्त रसायनों के साथ और एक निश्चित ताप तापमान पर किया जाता है।

निम्नलिखित अभिकर्मकों या रसायनों की आवश्यकता है:

• एक नमूना जिसमें न्यूक्लियोटाइड अनुक्रम होता है (रक्त, बाल, मवाद, त्वचा, आदि से)।
• डीएनए प्राइमर: छोटा एकल-फंसे डीएनए जो न्यूक्लियोटाइड अनुक्रमों से जुड़ा होता है जो न्यूक्लियोटाइड्स की पूरक श्रृंखला के संश्लेषण को बढ़ावा देता है।
• डीएनए पोलीमरेज़: एक एंजाइम, जो, जब डीएनए प्राइमर से जुड़ता है, तो पूरक बेस जोड़े बनाने के लिए डीएनए बिल्डिंग ब्लॉक्स के साथ डीएनए टुकड़े को नीचे उतारता है और इस प्रकार एक पूरक डीएनए न्यूक्लियोटाइड स्ट्रैंड को संश्लेषित करता है (एक गर्मी प्रतिरोधी डीएनए पोलीमरेज़, टैक पोलीमरेज़ का परिचय) गर्मी प्रतिरोधी बैक्टीरिया से प्राप्त, पीसीआर की क्षमता में उल्लेखनीय रूप से सुधार होता है)।
• समाधान में न्यूक्लियोटाइड्स (एडेनिन, थाइमिडीन, साइटोसिन और गुआनिन, संक्षेप में: ए, टी, सी और जी) नामक डीएनए निर्माण ब्लॉकों की एक बड़ी मात्रा। जब ये ब्लॉक एक साथ जुड़े होते हैं, तो वे एक न्यूक्लियोटाइड अनुक्रम या डीएनए का एक एकल स्ट्रैंड बनाते हैं। जब ये बिल्डिंग ब्लॉक अपने पूरक बिल्डिंग ब्लॉक को कमजोर हाइड्रोजन बॉन्ड के साथ बांधते हैं (उदाहरण के लिए, ए केवल टी और जी केवल सी से बंधेगा) तो एक पूरक डीएनए न्यूक्लियोटाइड अनुक्रम बनता है जो मूल एकल-फंसे डीएनए से जुड़ा होता है। जब बाइंडिंग पूरी हो जाती है, तो एक विशिष्ट क्रम में डबल-स्ट्रैंडेड पूरक डीएनए बनता है।

कारी मुलिस एक बहुत ही दिलचस्प, अच्छे चाचा हैं, देखो वह कितना दिलचस्प बताते हैं कि वह पीसीआर के साथ कैसे आए:

वह ज्योतिष में विश्वास करते हैं लेकिन यह नहीं मानते कि एचआईवी से एड्स होता है।)

पोलीमरेज़ श्रृंखला प्रतिक्रिया तब नमूने से एक डीएनए खंड के साथ शुरू होती है, जिसे उपरोक्त अभिकर्मकों के साथ एक टेस्ट ट्यूब में रखा जाता है। घोल को 94°C तक गर्म किया जाता है। गर्म करने से हाइड्रोजन बंधन टूट जाते हैं जो पूरक डीएनए स्ट्रैंड के निर्माण की अनुमति देते हैं, इसलिए मिश्रण में केवल एकल स्ट्रैंड मौजूद होते हैं (इसे डबल-स्ट्रैंडेड डीएनए विकृतीकरण कहा जाता है)।

मिश्रण को 54°C तक ठंडा होने दिया जाता है। इस तापमान पर, डीएनए प्राइमर और डीएनए पोलीमरेज़ अलग-अलग एकल-फंसे डीएनए से जुड़ते हैं (इसे डीएनए एनीलिंग कहा जाता है)। चूंकि मिश्रण में बिल्डिंग ब्लॉक्स अधिक मात्रा में (उच्च सांद्रता) होते हैं, पोलीमरेज़ उनका उपयोग नए पूरक डीएनए स्ट्रैंड (जिसे डीएनए विस्तार कहा जाता है) बनाने के लिए करता है और यह प्रक्रिया 72°C पर तेज़ होती है। यह प्रक्रिया मूल अणु के प्रत्येक एकल स्ट्रैंड से एक नया डबल-स्ट्रैंडेड डीएनए अणु बनाती है।

इस चक्र को थर्मल साइक्लर (थर्मोसाइक्लर) नामक मशीन में लगभग 40 बार दोहराया जाता है, जो स्वचालित रूप से हीट-कूल चक्र को दोहराता है, प्रत्येक डीएनए अनुक्रम की मात्रा हर बार हीट-कूल चक्र पूरा होने पर दोगुनी हो जाती है। जो मूल रूप से डीएनए का एक छोटा खंड था, उसे 40 दोहरीकरण चक्रों के बाद लगभग 100 बिलियन प्रतियों तक विस्तारित किया जा सकता है।

पीसीआर परीक्षण की आवश्यकता कब होती है?

पीसीआर परीक्षण कई प्रकार के परीक्षणों का आधार है जो कई अलग-अलग चिकित्सा प्रश्नों का उत्तर दे सकता है जो डॉक्टरों को रोगियों का निदान और इलाज करने में मदद करता है। उदाहरण के लिए, पीसीआर परीक्षण कर सकते हैं रोगजनक जीवों का पता लगाना और उनकी पहचान करनारोगियों में, विशेषकर उन लोगों में जिनका संवर्धन करना कठिन है (उदाहरणार्थ, एचआईवी और अन्य वायरस और कुछ कवक).

कुछ डॉक्टर निदान में सहायता के लिए पीसीआर परीक्षण लिखते हैं आनुवंशिक रोग, जबकि अन्य डॉक्टर जैविक संबंधों का पता लगाने के लिए पीसीआर का उपयोग करते हैं जैसे बच्चों के माता-पिता की पहचान. पीसीआर परीक्षणों का उपयोग पहचान और लक्षण वर्णन के लिए भी किया जाता है आनुवंशिक उत्परिवर्तनऔर पुनर्व्यवस्था निश्चित रूप से पाई गई कैंसर.

हालाँकि, पीसीआर परीक्षणों को संशोधित किया गया है और वैज्ञानिक अनुसंधान के कई पहलुओं में पेश किया गया है, जिसमें विकासवादी जीव विज्ञान, आनुवंशिक फिंगरप्रिंटिंग, फोरेंसिक विज्ञान और कई अन्य शामिल हैं।

आरटी-पीसीआर क्या है?

रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस पीसीआर (आरटी-पीसीआर) एक पीसीआर परीक्षण है जिसे आरएनए की मात्रा का पता लगाने और मापने के लिए डिज़ाइन किया गया है। यद्यपि मूल पीसीआर परीक्षण प्रवर्धित डीएनए का परीक्षण करता है, कई वायरस और अन्य जैविक घटक (जैसे माइटोकॉन्ड्रिया) आरएनए को अपनी आनुवंशिक सामग्री के रूप में उपयोग करते हैं। आरटी-पीसीआर पहले आरएनए को लेकर और आरएनए स्ट्रैंड को डीएनए स्ट्रैंड में बदलकर पारंपरिक पीसीआर से भिन्न होता है। यह अनिवार्य रूप से पीसीआर के लिए उसी तरह से किया जाता है जैसा कि ऊपर वर्णित है, डीएनए पोलीमरेज़ के बजाय रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस नामक एंजाइम का उपयोग करने को छोड़कर।

रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस आरएनए के एक स्ट्रैंड को डीएनए के पूरक स्ट्रैंड में परिवर्तित करने की अनुमति देता है। एक बार जब यह प्रतिक्रिया होती है, तो डीएनए को बढ़ाने के लिए एक नियमित पीसीआर विधि का उपयोग किया जा सकता है। आरटी-पीसीआर का उपयोग कई आरएनए वायरस का पता लगाने और उनका अध्ययन करने के लिए किया जाता है। आरटी-पीसीआर को एक अन्य पीसीआर वैरिएंट के साथ भ्रमित नहीं किया जाना चाहिए जिसे वास्तविक समय (वास्तविक समय) पीसीआर कहा जाता है।

वास्तविक समय पीसीआर पीसीआर का एक रूप है जो प्रक्रिया के सामान्य 40 चक्रों के भीतर प्रवर्धित डीएनए का विश्लेषण करने की अनुमति देता है। हालाँकि यह प्रक्रिया पारंपरिक साइक्लिंग पीसीआर के समान है, वास्तविक समय पीसीआर कुछ बिल्डिंग ब्लॉक्स या छोटे न्यूक्लियोटाइड स्ट्रैंड्स से जुड़े फ्लोरोसेंट रंगों का उपयोग करता है। उपयोग की गई विधि के आधार पर, प्रतिदीप्ति तब होती है जब प्रवर्धित डीएनए स्ट्रैंड बनते हैं। प्रतिदीप्ति की मात्रा को 40 चक्रों में मापा जा सकता है और शोधकर्ताओं को प्रवर्धन चक्रों के दौरान विशिष्ट उत्पादों और मात्राओं को मापने की अनुमति मिलती है।

यह अक्सर शोधकर्ताओं या तकनीशियनों को पीसीआर उत्पादों का विश्लेषण करने के लिए आवश्यक जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस या अन्य माध्यमिक प्रक्रियाओं को छोड़ने की अनुमति देता है, जिससे तेजी से परिणाम मिलते हैं। वास्तविक समय पीसीआर और आरटी-पीसीआर मूल पीसीआर परीक्षण के रूपांतर या संशोधन हैं। हालाँकि, अभी भी कई विकल्प (कम से कम 25) मौजूद हैं और विशिष्ट समस्याओं को हल करने के लिए उपयोग किए जाते हैं। इन सभी के अलग-अलग नाम हैं जैसे असेंबली पीसीआर, हॉट स्टार्ट पीसीआर, मल्टीप्लेक्स पीसीआर, सॉलिड-स्टेट पीसीआर और भी बहुत कुछ।

एचआईवी के लिए पीसीआर परीक्षण क्या है?

पीसीआर(पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन) - वायरस की आनुवंशिक सामग्री को गुणा करने की एक विधि, विश्लेषण जो वायरस की आनुवंशिक सामग्री को निर्धारित करता हैएचआईवी आरएनए या डीएनए.

यदि वायरस न्यूनतम मूल्य में निहित है, तो प्रतिक्रिया के परिणामस्वरूप, यह मात्रा कई गुना बढ़ जाती है। इसलिए, पीसीआर का उच्च नैदानिक ​​​​मूल्य है।

यह परीक्षण आमतौर पर निर्धारित करने के लिए उपयोग किया जाता है दान किये गये रक्त में एच.आई.वीया एचआईवी का शीघ्र पता लगाने के लिएएचआईवी के प्रति विशिष्ट एंटीबॉडी के उत्पादन से पहले शरीर में। विशिष्ट एंटीबॉडी एचआईवी (एलिसा) के लिए सामान्य परीक्षण निर्धारित करते हैं, लेकिन केवल 1-3 के बाद, शायद ही कभी संक्रमण के 12 महीने बाद। ए पीसीआर का उपयोग करके, आप 14 दिनों के बाद काफी सटीक उत्तर दे सकते हैं 98% की निश्चितता के साथ और 5 दिनों के बाद भी, लेकिन तब विश्वसनीयता 80% होगी। एचआईवी के लिए पीसीआर एलिसा की तुलना में महंगा और अधिक समय लेने वाला परीक्षण है इसका उपयोग हर कोई नहीं करता, लेकिन केवल विशेष संकेतों के लिए (एचआईवी संक्रमित चिकित्सा दुर्घटना से पीड़ित दाता) या शुल्क के लिए।

एचआईवी के लिए गुणात्मक पीसीआर विश्लेषण- यह निर्धारित करता है कि एचआईवी-1/एचआईवी-2 वायरस है या नहीं, लेकिन यह वायरस की प्रतियों की संख्या निर्धारित नहीं करता है (मात्रात्मक पीसीआर का उपयोग मात्रा निर्धारित करने के लिए किया जाता है)। गुणात्मक पीसीआर उन लोगों के लिए नहीं किया जाता है जिन्हें "एचआईवी संक्रमण" का निदान माना जाता है। उसका वे ऐसा केवल उन लोगों के साथ करते हैं जिन्हें अभी तक पता नहीं है कि वे एचआईवी से संक्रमित हैं या नहीं।

यह एचआईवी प्रभावित लिम्फोसाइट कोशिका के जीनोम में पूरक डीएनए क्षेत्र को निर्धारित करने की एक विधि है। वे। यह स्वयं वायरस नहीं है जो निर्धारित होता है, बल्कि वह सामग्री है जिसे वायरस कोशिका में डालता है। कोशिका नाभिक में, इसका डीएनए पहले से ही संग्रहीत होगा, जिससे इसे पढ़ा जाएगा और गुणा किया जाएगा (स्वयं की प्रतिलिपि बनाई जाएगी)।

एचआईवी के लिए मात्रात्मक पीसीआर विश्लेषण

एचआईवी आरएनए के लिए मात्रात्मक पीसीआर विश्लेषण- रक्त में आरएनए वायरस की प्रतियों की संख्या निर्धारित करता है (पीसीआर डीएनए का उपयोग कोशिकाओं में वायरस को निर्धारित करने के लिए किया जाता है, उदाहरण के लिए, बच्चों में)। यह केवल एचआईवी संक्रमित लोगों में ही किया जाता है, उपचार को नियंत्रित करने के लिए, रोग के विकास की गंभीरता, उपचार की प्रभावशीलता का निर्धारण करें।

पीसीआर पद्धति का उपयोग करके संक्रमण के कितने समय बाद एचआईवी का पता लगाया जा सकता है?

एचआईवी पॉजिटिव साथी के संपर्क के बाद मैं एचआईवी के लिए कितने दिनों तक पीसीआर ले सकता हूं?

संक्रमण के 4-14 दिन बाद पीसीआर द्वारा एचआईवी का पता लगाया जा सकता है। एचआईवी के लिए एक नकारात्मक पीसीआर परिणाम जोखिम भरे संपर्क के 14 दिनों के बाद विश्वसनीय होता है, लेकिन वर्तमान नियमों के अनुसार, सहायता के साथ परीक्षण अभी भी आवश्यक है।

डीएनए पीसीआर और एचआईवी आरएनए पीसीआर के बीच क्या अंतर है?

शाही सेनाआमतौर पर निदान किए गए व्यक्तियों में वायरल लोड का आकलन करने के लिए मात्रात्मक परीक्षणों में उपयोग किया जाता है, उदाहरण के लिए, चिकित्सा की प्रभावशीलता का आकलन करने के लिए।

डीएनए- मोनोन्यूक्लियर कोशिकाओं में, उदाहरण के लिए, बच्चों में निदान के लिए, जहां माताओं के एचआईवी के प्रति एंटीबॉडी एलिसा विधि के उपयोग में हस्तक्षेप करते हैं।

दोनों परीक्षण मात्रात्मक और गुणात्मक दोनों हो सकते हैं।

निदान के विशेष मामलों में एक और दूसरे दोनों को लागू किया जा सकता है, लेकिन सिस्टम के तकनीकी मापदंडों द्वारा लगाए गए विशिष्ट प्रतिबंधों को ध्यान में रखते हुए, अर्थात। डॉक्टर के प्रिस्क्रिप्शन से.

क्या एचआईवी के लिए पीसीआर ग़लत सकारात्मक हो सकता है, कारण?

अगर सही से किया जाए: नर्स ने ट्यूबों को मिलाया नहीं, रक्त लेने से पहले पासपोर्ट को देखा, ट्यूब पर सही लेबल लगाया, दिशा सही लिखी, आदि, और प्रयोगशाला विशेषज्ञ (आमतौर पर एक प्रयोगशाला सहायक) ने निर्देशों के अनुसार सब कुछ किया, उन्होंने प्रयोगशाला नियमों की सभी आवश्यकताओं को पूरा किया (उदाहरण के लिए, बायोमटेरियल को सही ढंग से "लिखा हुआ" किया गया था, बिना क्रॉस-संदूषण (संदूषण) आदि के) और एक उच्च गुणवत्ता वाली परीक्षण प्रणाली का उपयोग किया गया था, तब पीसीआर केवल गलत सकारात्मक हो सकता है 2% मामलों में (यह प्रयुक्त परीक्षण प्रणालियों की संवेदनशीलता के कारण होता है)।

लेकिन यदि मेडिकल स्टाफ द्वारा गलतियाँ की गईंसंस्थान , तब पीसीआर 2% से अधिक मामलों में गलत सकारात्मक हो सकता है।

एचआईवी के लिए पीसीआर परीक्षण कैसे किया जाता है?

पीसीआर द्वारा एचआईवी परीक्षण के लिए, रक्त एक नस से लिया जाता है, अधिमानतः (लेकिन जरूरी नहीं) सुबह खाली पेट।

मैं एचआईवी पीसीआर के लिए परीक्षण कहां करवा सकता हूं?

ऐसा करने के लिए, आपको अपने ब्राउज़र की खोज में प्रवेश करना होगा " पीसीआर एचआईवी पास करें "और अनुरोध में अपना इलाका जोड़ें और आप ऐसे संगठन देखेंगे जो पीसीआर पर आपके शोध में लगे हुए हैं।

उदाहरण के लिए,

पीसीआर एचआईवी परीक्षण की लागत कितनी है?

पास में 1.5-3 हजार रूबलक्षेत्र के आधार पर.

एचआईवी के लिए पीसीआर परीक्षण परिणामों की विश्वसनीयता क्या है?

के माध्यम से 14 दिनसंक्रमण के बाद, एचआईवी के लिए पीसीआर की विश्वसनीयता 100% है, 4-5 दिनों से - 80% की विश्वसनीयता।

एचआईवी के लिए पीसीआर परीक्षण में कितना समय लगता है?

तकनीकी तौर पर 4-6 घंटे, लेकिन वास्तव में यह प्रयोगशाला के काम के संगठन पर निर्भर करता है और आमतौर पर परिणाम 2-3 दिनों में जारी किया जाता है।

नवजात शिशु में एचआईवी के लिए पीसीआर

चूंकि एचआईवी+ मां से पैदा हुए 1.5 वर्ष से कम उम्र के बच्चे में एचआईवी के खिलाफ एंटीबॉडी बरकरार रहती है, इसलिए एलिसा का उपयोग करके यह निर्धारित करना असंभव है कि बच्चा एचआईवी से संक्रमित है या नहीं। ऐसी स्थिति में पीसीआर का उपयोग किया जाता है:

• यदि पीसीआर का उपयोग करके 1 महीने की उम्र के बच्चे में वायरस पाया जाता है, तो वह संक्रमित हो गया है।
• यदि 1-2 महीने और 4-6 महीने में बच्चे का पीसीआर नकारात्मक है, तो, बशर्ते कि माँ ने उसे अपना स्तन का दूध न पिलाया हो, बच्चा स्वस्थ है।

पीसीआर और एलिसा में क्या अंतर है?

पीसीआर स्वयं वायरस का निर्धारण करता है, और एलिसा वायरस के प्रति शरीर की प्रतिक्रिया (एंटीबॉडी के रूप में) निर्धारित करता है।

पीसीआर एलिसा की तुलना में तेजी से वायरस की उपस्थिति का पता लगाता है।

एचआईवी का निर्धारण करने के लिए एक नया एल्गोरिदम।

एचआईवी/एड्स द्वारा हमें 30 वर्षों तक मूर्ख बनाया गया है, यह एक चिकित्सीय तथ्य है जिसके लिए लंबे समय से किसी प्रमाण की आवश्यकता नहीं है। मैं किसी को ठेस नहीं पहुँचाना चाहता, लेकिन सच्चाई यह है कि इस समय, आपके सामने एक वैकल्पिक दृष्टिकोण के बारे में सभी उपलब्ध जानकारी, यानी एचआईवी असंतुष्टों द्वारा प्रस्तुत, इसे जारी रखना और आगे भोलेपन से असंभव है कृत्रिम रूप से निर्मित और थोपे गए एचआईवी/एड्स सिद्धांत के सनकी और कपटपूर्ण प्रचार में विश्वास करें।

यदि आपने इस तथ्य के बारे में अपना आश्चर्य व्यक्त किया है कि एचआईवी के लिए नैदानिक ​​​​परीक्षण स्वयं वायरस का निर्धारण नहीं करते हैं, बल्कि केवल इसके प्रति एंटीबॉडी का निर्धारण करते हैं, और यह न केवल एंजाइम इम्यूनोएसे पर लागू होता है, बल्कि प्रतिरक्षा ब्लॉटिंग पर भी लागू होता है, जिसे अधिक सटीक माना जाता है, तो आप शायद डॉक्टरों या कुछ जानकार लोगों का आश्वासन सुना है कि एक पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन विधि है जिसका एंटीबॉडी से कोई लेना-देना नहीं है, बल्कि सीधे वायरस का ही पता लगाता है।
क्या आपने पीसीआर डायग्नोस्टिक्स की विधि और विशेष रूप से एचआईवी संक्रमण के बारे में सुना है? पक्का। क्या आपने गहराई से जानने और इसका पता लगाने की कोशिश की है? नहीं? तो यह स्पष्ट है कि हमें मूर्ख बनाया जा रहा है? अच्छा। लेकिन अब मैं इसे उंगलियों पर साफ-साफ दिखाऊंगा...

हां, हम वास्तव में बेशर्मी और निंदनीय रूप से मूर्ख हैं जब हमें आश्वासन दिया जाता है कि एचआईवी के लिए पीसीआर परीक्षण वायरस की उपस्थिति या रक्त में इसकी एकाग्रता, यानी वायरल लोड को निर्धारित करता है। और मुझे तुरंत कहना होगा कि इस संबंध में पीसीआर विधि न केवल एलिसा और आईबी से किसी भी तरह से भिन्न नहीं है, बल्कि यह सीधे तौर पर बिल्कुल उसी सिद्धांत पर आधारित कहा जा सकता है।
इसका मतलब क्या है? मैं आपको याद दिला दूं कि नैदानिक ​​एचआईवी परीक्षण एलिसा और इम्युनोब्लॉट परीक्षण नमूने में एंटीबॉडी की परीक्षण में रखे गए वायरस एंटीजन के साथ प्रतिक्रिया पर आधारित होते हैं। इन एचआईवी प्रोटीनों के रूप में परीक्षण प्रणालियों में क्या है - केवल भगवान ही जानता है, और शायद यही सब कुछ नहीं है। तदनुसार, यह बिल्कुल स्पष्ट नहीं है कि कौन से एंटीबॉडी इन कथित एचआईवी प्रोटीन के साथ प्रतिक्रिया करते हैं, जिसके परिणामस्वरूप बीमारियों और स्थितियों की 62-आइटम सूची बनती है जो गलत सकारात्मकता का कारण बनती है।

पोलीमरेज़ श्रृंखला प्रतिक्रिया विधि का आधार क्या है, और संक्रामक रोगों की उपस्थिति का निदान कैसे किया जाता है? हेपेटाइटिस और एचआईवी के मामले में मरीज के खून की जांच की जाती है। अध्ययन के तहत रक्त के नमूने में एक विशिष्ट रोगज़नक़ की उपस्थिति स्थापित करने के लिए, पीसीआर परीक्षण के लिए एक प्राइमर का उपयोग किया जाता है, अर्थात, रोगज़नक़ का एक डीएनए टुकड़ा, जो इसके डीएनए के एक विशिष्ट खंड का पूरक है, अर्थात, संक्षेप में, प्राइमर डीएनए अनुभाग से उसी तरह जुड़ा होता है जैसे अनुभाग डीएनए के दोहरे हेलिक्स के साथ एक दूसरे से जुड़े होते हैं।
आपको समझ आया? आपका रक्त लिया जाता है, फिर इसमें कुछ ऐसा जोड़ा जाता है जो निस्संदेह एचआईवी वायरस जीनोम का एक अनूठा हिस्सा होता है, अन्य आवश्यक तत्व जोड़े जाते हैं, फिर यह सब तीस बार गर्म और ठंडा होता है, और परिणामस्वरूप - वोइला! आप एचआईवी पॉजिटिव हैं! आपका वायरल लोड 3 मिलियन है! तुरंत चिकित्सा शुरू करें!

पर रुको। क्या तुम्हें नहीं दिखता कि तुम्हें शुरू से ही कैसे मूर्ख बनाया गया?
आपको आश्वस्त किया गया था कि पीसीआर पद्धति स्वयं ही वायरस का पता लगा लेती है। लेकिन यह सरासर झूठ है! इस संबंध में पीसीआर पद्धति एलिसा और आईबी से अलग नहीं है! चूँकि, एचआईवी एंटीजन की आड़ में, कोई नहीं जानता कि परीक्षण प्रणालियों में क्या उपयोग किया जाता है, इसलिए पीसीआर परीक्षणों में, एचआईवी के डीएनए के हिस्से के रूप में दिए गए प्राइमर की आड़ में, यह भी पूरी तरह से अज्ञात है कि कौन सा पदार्थ है उसी प्रकार प्रयोग किया जाता है। आप समझते हैं कि यदि एचआईवी मौजूद नहीं है, तो एचआईवी डीएनए, या एचआईवी आरएनए, या एचआईवी के प्रति एंटीबॉडी का कोई सवाल ही नहीं हो सकता है, विशेष रूप से मातृ शिशुओं में, जिसके साथ हमारा ब्रेनवॉश किया जाता है, यह बताते हुए कि सभी बच्चे एचआईवी पॉजिटिव माताओं से हैं, और जीवन के दूसरे वर्ष में अपने आप गायब हो जाते हैं...

इस कदर।
- पीसीआर विधि स्वयं एचआईवी वायरस का पता लगाती है, इसमें कोई गलती या संदेह नहीं हो सकता है! और यह सबसे सटीक तरीका वायरल लोड को दर्शाता है, जो बीमारी की गतिशीलता और उसके उपचार की निगरानी के लिए बहुत महत्वपूर्ण है!
- अच्छा, अच्छा.. क्या आप वायरस के बारे में ही बात कर रहे हैं? प्राइमर के रूप में क्या प्रयोग किया जाता है? वही वायरस? वह जिसे मॉन्टैग्नियर और गैलो ने 30 साल पहले खोजा था? क्या उन्होंने सचमुच उसे ढूंढ लिया? सचमुच साफ़ हो गया? क्या यह सचमुच फोटो खींचा गया था? क्या यह सच है कि वह प्रतिकृति/प्रजनन के लिए टी-लिम्फोसाइट्स का उपयोग करता है, जिसके परिणामस्वरूप उनकी कुल संख्या समाप्त हो जाती है और खतरनाक इम्युनोडेफिशिएंसी शुरू हो जाती है? क्या ये सब सच है?

और संक्षेप में, स्पीडोलॉजी में पीसीआर पद्धति का उपयोग इसके आविष्कारक, कैरी मुलिस (बल्कि, उनकी राय के विपरीत भी नहीं!) के लिए किया जाता है, लेकिन मॉन्टैग्नियर और गैलो के लिए धन्यवाद, जिन्होंने अपनी उंगली से एचआईवी को चूस लिया, और जिनके डीएनए प्राइमरों का उपयोग एचआईवी के पीसीआर निदान में किया जाता है...

तो यह यहाँ है. यदि आपसे कहा गया है कि आपके पीसीआर परीक्षण के परिणाम बताते हैं कि आप एचआईवी पॉजिटिव हैं और उच्च वायरल लोड है, या यह आपका बच्चा है, तो एक पल के लिए भी चिंता न करें! तुम्हें धोखा दिया जा रहा है! पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन विधि के आविष्कारक, माइक्रोबायोलॉजिस्ट कैरी मुलिस, एक एचआईवी असंतुष्ट हैं, और वह स्पष्ट रूप से एचआईवी निदान में पीसीआर के उपयोग के खिलाफ हैं, क्योंकि वह अच्छी तरह से समझते हैं कि गैर-मौजूद एचआईवी वायरस के मामले में, यह उचित है एक बेशर्म निंदक धोखा...

एक और क्षण. क्या आपने किसी अज्ञात वायरल लोड के बारे में सुना है? तथ्य यह है कि सभी एचआईवी पॉजिटिव लोगों के रक्त में वायरस की मात्रा का परीक्षण करने पर एक निश्चित परिणाम नहीं मिलता है, जिसे मूल्य के आधार पर कम या उच्च वायरल लोड माना जाता है। अगर ऐसे बहुत कम लोग होते तो उनके बारे में बात ही नहीं की जाती. लेकिन तथ्य यह है कि जाहिरा तौर पर उनमें से बहुत सारे हैं, और इसलिए वे एचआईवी संक्रमण में अज्ञात वायरल लोड के बारे में बात करते हैं। मैं उस पीआर थेरेपी का उल्लेख नहीं करूंगा जो कथित तौर पर वीएल को ज्ञानी नहीं होने तक कम कर देती है। नहीं, असल बात तो यह है कि बहुत से लोगों में बिना किसी थेरेपी के इसका पता नहीं चल पाता है। कभी नहीं।
अर्थात्, रोगी को एचआईवी संक्रमण का निदान किया गया था, लेकिन पीसीआर डायग्नोस्टिक्स की प्रसिद्ध अल्ट्रा-सेंसिटिव कॉस्मिकली सटीक विधि का उपयोग करके, उसके शरीर में एचआईवी वायरस का पता लगाना असंभव है। ऐसा कैसे?

और फिर हमें बताया गया कि विधि, बेशक, सबसे अनोखी है, लेकिन आधुनिक तकनीकी साधन अभी भी प्रतिबंध लगाते हैं, और पीसीआर डायग्नोस्टिक्स द्वारा साआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआआ है।

यानी मरीज को एचआईवी जरूर है. यह वायरस लाइलाज, अविनाशी, धूर्त, धूर्त, कपटी, अत्यंत चतुर और आविष्कारशील है। और यहां तक ​​कि सुपर जादुई पीसीआर विधि भी यह पता लगाने में सक्षम नहीं है कि चालाक वायरस वैज्ञानिकों और डॉक्टरों से कहां छिपा है।
यह पता चला है कि, एक तरफ, वे हमें बताते हैं कि एक अद्भुत और उच्च परिशुद्धता पीसीआर विधि क्या है, यह एक अणु द्वारा पूरे हाथी और यहां तक ​​​​कि एक व्हेल का अनुमान लगा सकती है - और दूसरी तरफ, अपनी आँखें नीचे करके, वे उन हजारों रोगियों में अज्ञात वायरल लोड के बारे में अस्पष्ट रूप से बड़बड़ाते हैं जो एचआईवी संक्रमण के निदान के साथ जी रहे हैं और एंटीरेट्रोवाइरल उपचार नहीं ले रहे हैं।

तो यह जाता है। वे हमें जितना चाहें उतना मूर्ख बनाते हैं। और निडर मूर्ख मत बनो. किसी डॉक्टर और वैज्ञानिक की बात पर विश्वास न करें. वे आपको पीसीआर परीक्षणों की लौकिक सटीकता के बारे में सात बक्सों में तीन बार बताएंगे, लेकिन इस समय इस मामले में उपयोग किए जाने वाले एचआईवी प्राइमरों के बारे में सिर्फ एक टिप्पणी और पूरी शानदार तस्वीर को चकनाचूर कर देगी। क्योंकि मनोरंजन के लिए, आप कह सकते हैं कि जिस तरह गैलो ने नकली एचआईवी वायरस की खोज के बाद पहले एचआईवी परीक्षणों का पेटेंट कराया था, उसी तरह वह एचआईवी संक्रमण के पीसीआर निदान के लिए एचआईवी प्राइमरों का पेटेंट करा सकता था, क्योंकि प्राइमर मूलतः एचआईवी एंटीजन के समान ही होते हैं। क्या कुछ विशिष्ट जैविक पदार्थ केवल इस वायरस (जीनोम टुकड़े या विशिष्ट प्रोटीन) में निहित हैं...